Un panel gastrointestinal multiplex analiza una sola muestra de heces en busca de veinte o m\u00e1s pat\u00f3genos a la vez y ofrece una respuesta en una a cinco horas. Comparado con el enfoque anterior, en el que el cultivo, la microscop\u00eda y las pruebas de ant\u00edgenos se ped\u00edan por separado a lo largo de varios d\u00edas, supone una mejora considerable.<\/p>\n
Tambi\u00e9n genera un problema que antes no exist\u00eda. Como estos paneles son extremadamente sensibles y analizan organismos que nadie sospechaba espec\u00edficamente, detectan de forma habitual cosas que est\u00e1n presentes pero que no son las responsables. Aprender a leer un informe multiplex significa aprender qu\u00e9 detecciones requieren actuaci\u00f3n y cu\u00e1les se pueden dejar de lado.<\/p>\n
Un panel multiplex es un ensayo molecular que amplifica y detecta simult\u00e1neamente muchos pat\u00f3genos distintos en una sola reacci\u00f3n, utilizando conjuntos de cebadores y sondas fluorescentes espec\u00edficos para cada uno. En el an\u00e1lisis gastrointestinal, un panel t\u00edpico incluye bacterias, virus y par\u00e1sitos a la vez.<\/p>\n
Los sistemas comerciales de uso habitual incluyen BioFire FilmArray, QIAstat-Dx, BD MAX Enteric panels, Luminex NxTAG y EntericBio; difieren en la lista de pat\u00f3genos, el tiempo de respuesta y la capacidad de procesamiento. Algunos funcionan con cartuchos y pueden usarse de forma individual; otros se procesan en lotes.<\/p>\n
La qu\u00edmica es la misma que en cualquier PCR, ejecutada muchas veces en paralelo. Se extrae el \u00e1cido nucleico de la muestra de heces y se distribuye en reacciones que contienen cebadores espec\u00edficos para cada diana. Las dianas de ARN, es decir, los virus ent\u00e9ricos, requieren primero un paso de transcripci\u00f3n inversa, por lo que estos paneles combinan RT-PCR y PCR. La amplificaci\u00f3n se monitoriza en tiempo real, y cada diana se distingue por su propio canal fluorescente, mediante an\u00e1lisis de temperatura de fusi\u00f3n o por separaci\u00f3n f\u00edsica en un array microflu\u00eddico.<\/p>\n
El reto t\u00e9cnico est\u00e1 en que los cebadores para m\u00e1s de veinte dianas deben coexistir en la misma reacci\u00f3n sin reaccionar entre s\u00ed, manteniendo al mismo tiempo la sensibilidad para cada una. Los sistemas modernos de cartucho resuelven esto compartimentando f\u00edsicamente las reacciones, lo que explica su buen rendimiento, aunque su coste es considerablemente mayor que el de los an\u00e1lisis de diana \u00fanica.<\/p>\n
No se requiere ayuno ni preparaci\u00f3n diet\u00e9tica. Conviene informar sobre el uso reciente de antibi\u00f3ticos, ya que reduce la carga bacteriana y puede dar lugar a falsos negativos. El momento de la toma importa: recoger la muestra durante los s\u00edntomas activos ofrece el mayor rendimiento diagn\u00f3stico.<\/p>\n
Se recoge una \u00fanica muestra de heces en un recipiente que suele contener un medio de transporte como Cary-Blair. Sigue las instrucciones del kit en cuanto a volumen y conservaci\u00f3n, y evita la contaminaci\u00f3n con orina o agua del inodoro.<\/p>\n
Los sistemas basados en cartucho devuelven resultados en aproximadamente una a cinco horas. Las plataformas de laboratorio por lotes pueden tardar un d\u00eda. Un aspecto pr\u00e1ctico importante: un resultado bacteriano positivo en un panel molecular no proporciona un aislado, por lo que si se necesita un antibiograma o una tipificaci\u00f3n de cepa para salud p\u00fablica, hay que solicitar por separado un cultivo de confirmaci\u00f3n.<\/p>\n
Los resultados se notifican como detectado o no detectado para cada diana del panel. La mayor\u00eda de los informes listan todas las dianas, por lo que lo habitual es ver una p\u00e1gina con entradas de no detectado y uno o dos positivos.<\/p>\n