Ein gastrointestinales Multiplex-Panel untersucht eine einzige Stuhlprobe gleichzeitig auf zwanzig oder mehr Krankheitserreger und liefert das Ergebnis innerhalb von einer bis f\u00fcnf Stunden. Im Vergleich zum \u00e4lteren Verfahren, bei dem Kultur, Mikroskopie und Antigentests \u00fcber mehrere Tage hinweg separat angeordnet wurden, ist dies ein erheblicher Fortschritt.<\/p>\n
Gleichzeitig bringt es ein Problem mit sich, das es zuvor nicht gab. Da diese Panels \u00e4u\u00dferst empfindlich sind und auf Erreger testen, die niemand gezielt vermutet hat, weisen sie routinem\u00e4\u00dfig Dinge nach, die zwar vorhanden, aber nicht urs\u00e4chlich sind. Einen Multiplex-Befund richtig zu lesen bedeutet zu lernen, welche Nachweise relevant sind und welche man beiseitelassen kann.<\/p>\n
Ein Multiplex-Panel ist ein molekularer Test, der viele verschiedene Erregerziele gleichzeitig in einer einzigen Reaktion amplifiziert und nachweist \u2013 mithilfe spezifischer Primerpaare und fluoreszierender Sonden f\u00fcr jeden Erreger. Bei der Stuhldiagnostik umfasst ein typisches Panel Bakterien, Viren und Parasiten gemeinsam.<\/p>\n
Zu den g\u00e4ngigen kommerziellen Systemen z\u00e4hlen BioFire FilmArray, QIAstat-Dx, BD MAX Enteric Panels, Luminex NxTAG und EntericBio. Sie unterscheiden sich hinsichtlich der erfassten Zielorganismen, der Bearbeitungszeit und des Probendurchsatzes. Einige sind kartuschbasiert und k\u00f6nnen einzeln betrieben werden, andere werden im Batch-Verfahren verarbeitet.<\/p>\n
Die Chemie ist dieselbe wie bei jeder PCR, die viele Male parallel durchgef\u00fchrt wird. Nukleins\u00e4ure wird aus der Stuhlprobe extrahiert und anschlie\u00dfend auf Reaktionsans\u00e4tze mit zielspezifischen Primern verteilt. RNA-Ziele \u2013 also die enterischen Viren \u2013 erfordern zun\u00e4chst einen reversen Transkriptionsschritt, weshalb diese Panels eine Kombination aus RT-PCR und PCR darstellen. Die Amplifikation wird in Echtzeit \u00fcberwacht, und jedes Ziel wird durch seinen eigenen Fluoreszenzkanal, durch eine Schmelztemperaturanalyse oder durch physische Trennung in einem mikrofluidischen Array unterschieden.<\/p>\n
Die technische Herausforderung besteht darin, dass Primer f\u00fcr mehr als zwanzig Ziele in derselben Reaktion koexistieren m\u00fcssen, ohne miteinander zu reagieren, und dabei die Empfindlichkeit f\u00fcr jedes einzelne Ziel erhalten bleibt. Moderne Kartuschen-Systeme l\u00f6sen dieses Problem durch die physische Kompartimentierung der Reaktionen \u2013 weshalb sie zuverl\u00e4ssige Ergebnisse liefern, aber deutlich teurer sind als Einzelziel-Tests.<\/p>\n
Eine N\u00fcchternheit oder besondere Ern\u00e4hrungsvorbereitung ist nicht erforderlich. Eine k\u00fcrzlich erfolgte Antibiotikaeinnahme sollte angegeben werden, da sie die Bakterienlast senkt und falsch-negative Ergebnisse verursachen kann. Der Zeitpunkt ist entscheidend: Eine Probenentnahme w\u00e4hrend aktiver Symptome liefert die h\u00f6chste Ausbeute.<\/p>\n
Eine einzelne Stuhlprobe wird in einem Beh\u00e4lter gesammelt, der h\u00e4ufig ein Transportmedium wie Cary-Blair enth\u00e4lt. Befolgen Sie die Anweisungen des Kits zu Menge und Lagerung, und vermeiden Sie eine Verunreinigung mit Urin oder Toilettenwasser.<\/p>\n
Kartuschensysteme liefern Ergebnisse in etwa einer bis f\u00fcnf Stunden. Laborplattformen mit Stapelverarbeitung k\u00f6nnen einen Tag ben\u00f6tigen. Ein wichtiger praktischer Hinweis: Ein positives bakterielles Ergebnis aus einem molekularen Panel liefert kein Isolat. Wenn daher eine Antibiotikaempfindlichkeitstestung oder eine Stammtypisierung f\u00fcr den \u00f6ffentlichen Gesundheitsdienst erforderlich ist, muss separat eine Reflexkultur angefordert werden.<\/p>\n
Die Ergebnisse werden f\u00fcr jedes Ziel im Panel als \u201enachgewiesen\" oder \u201enicht nachgewiesen\" angegeben. Die meisten Befunde listen alle Ziele auf, sodass eine Seite mit Eintr\u00e4gen \u201enicht nachgewiesen\" und ein oder zwei positiven Befunden das \u00fcbliche Erscheinungsbild ist.<\/p>\n